Окситетрациклин

410_02

Качественные реакции

1. При добавлении 2 мл концентрированной серной кислоты к нескольким миллиграммам окситетрациклина появляется сравни-

тельно стабильная ярко-красная окраска. Эта цветная реакция оказалась специфичной для окситетрациклина при сравнении с другими обычно встречающимися антибиотиками (хлортетрациклин ^г дает лазурево-голубую окраску).

2.  Окситетрациклин с различными диазотированными соединениями дает окрашенные продукты. При прибавлении к окситетра-циклину раствора диазотированной сульфаниловой кислоты появляется интенсивная оранжево-желтая окраска.

3.  Для отличия от хлортетрациклина пользуются в качестве проявителя при бумажной хроматографии 2%-ным раствором пара-диметиламинобензальдегида в 1,2 н. соляной кислоте. Хлор-тетрациклин через 5-8 часов после обработки бумаги таким раствором дает грязновато-желтое пятно, тогда как окситетрациклин в тех же условиях окрашивает бумагу в сине-зеленый цвет. Чувствительность реакции 5 y антибиотика, распределенного на поверхности диаметром 1 см.

К 1 мл 0,05%-ного раствора хлор/тетрациклина добавляют 0,15 мл серной кислоты; смесь в течение 2 минут нагревают в кипящей воде. При этом хлортетрациклин дает интенсивное желтое окрашивание, а в растворе окситетрациклина выпадает желтый осадок. В этом случае к раствору окситетрациклина перед нагреванием добавляется 0,1 мл 1 молярного раствора нитрита натрия, сначала появляется оранжево-красное окрашивание, а затем выпадает желтый осадок.

4.  С реактивом Несслера выпадает осадок зеленого цвета.

5.  С раствором нитропруссида натрия выпадает темно-зеленый осадок. Эта реакция очень характерна, так как хлортетрациклин дает красный студнеобразный осадок.

Количественное определение

Колориметрический метод с хлорным железом. Приготовляется раствор, содержащий примерно 0,5 мг окситетрациклина в 1 мл при рН 2,0. Один или два эквивалента раствора доводят 0,01 н. соляной кислотой до 10 мл и добавляют 10 мл 0,05%-ного раствора хлорного железа в 0,01 н. соляной кислоте. Перемешанный раствор оставляют при комнатной температуре в течение 10 минут. При этом появляется оранжево-коричневая окраска, стабильная в течение 2 часов.

Для колориметрирования пользуются фотоэлектроколориметром со светофильтром, имеющим длину волны 490 ммк; для сравнения применяется реактив, приготовленный в то же время и таким же образом, что и раствор окситетрациклина. Концентрацию анализируемого раствора определяют по стандартной кривой, полученной при определении раствора, содержащего 500 у/мл окситетрациклина в 0,01 н. соляной кислоте; рН этого раствора равен примерно 2,0. Погрешность опытов составляет i2%. Метод применим для анализа окситетрациклина в капсюлях, таблетках и мазях при содержании его в растворе от 50 "у/ш* и выше.

Возникновение оливково-зеленого цвета раствора через 10 минут после прибавления реактива указывает на разрушение окситетрациклина и невозможность проведения колориметрического определения.

О методе количественного определения окситетрациклина по принципу определения сахара по Бертрану ^г см. литературу.